醫院藥學/醫院藥學儀器設備的使用規范
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醫院藥學儀器使用管理的任務有兩個方面:一是保證儀器設備的安全,包括數量上的準確性和質量盧的完好性,以便完整地保持其使用價值;二是提高儀器設備的使用率,充分發揮其醫療效益,追求更多的社會效益和經濟效益。儀器設備使用的規范化管理涉及管理思想、制度建設、財產帳目、技術檔案建立、使用率調查以及教育培訓等六方面問題。管理思想方面要求充分調動使用人中的積極性,增強責任房,愛護公共財物,把設備管好用好;提倡專管共用,協作共用,提高使用率。制度建設方面應健全。到貨、驗貨、倉儲、分配發放,在用設備管理(包括技術檔案、操作規程、調配、組織共用)、獻策產清點、退庫利用及調劑處理、報廢等一系列規章制度,力必使財產帳目健全、帳帳相符、帳實相符。技術檔案方面,對貴重精密儀器設備建立技術檔案。貴重精密儀器設備的劃分可采用價格與精密度相結合的方法,一般指價值1萬元以上的儀器,也可在5000元以上的儀器,或價值雖不足規定金額,但其精密度甚高,應特別注意保養的,亦可劃入貴重精密儀器齊備。
(一)醫院藥學貴重儀器設備的使用要求有三方面
1.貴重儀器設備的要求:
(1)有專人保管(應熟悉該儀器設備的性能、使用等)。大型精密儀器設備應有專人使用。
(2)設立技術檔案(包括訂貨合同、說明書、驗收記錄、主件及附件清單、登記卡片、操作規程、保養和維修記錄等)。
(3)有使用記錄和性能動態記錄。
2.貴重儀器設備使用操作人中職責:
(1)嚴格遵守操作規程和儀器管理規定。
(2)愛護儀器設備,責任心強。
(3)技術操作熟練,經考核合格。
3.貴重儀器設備使用保管人中職責:
(1)保持儀器設備隨時處于完好狀態,經常檢查、保養,及時維修。
(2)檢查使用登記情況,發現問題,及量報告解決。
(3)保存技術檔案,更換保管人員時,交待手續清楚。
(4)補充零配件及消耗品。
(二)儀器設備的使用管理方法,一般均以帳卡、檔案、制度、規定為管理的主要方法。
1.建立儀器設備管理帳以“儀器設備管理卡片”為記帳憑證,做為儀器設備管理和清查時依據,是各種儀器設備各種數據統計的原始資料,但不作為財務結算和物資發放的依據。
2.建立儀器設備管理卡,儀器出庫時填寫管理卡,并由使用單位人要卡片上任免蓋章。管理卡片一式三份,器械科存一份作為管理帳,使用單位二份,一份由使用單位保存,作為清點和管理儀器設備的依據,一份隨儀器設備存放在技術檔案內。
3.建立技術檔案,包括訂貨合同,發標提貨單據,出入庫憑證副聯,驗收記錄,產品樣本說明書,線路圖,安裝及運轉技術要求,安裝調試記錄,試驗報告,使用操作登記,操作規程,檢驗記錄,維修保養記錄,損壞報告及原因分析,零件耗損及補充記錄吧及其他有關的一切技術資料。目前多數單位建立精密儀器設備履歷書,作為技術檔案的主要內容,其優點是便于保存和查閱。技術檔案應按統一建立,并設專人專職或兼職管理。原始資料的正本存于技術檔案里,儀器設備說明書、線路圖等復印件一份隨儀器設備存放于使用單位處,對貴重精密儀器可設“精密儀器使用設備維修記錄簿”,由保養人負責管理,每次使用后,要逐項登記日期,使用時數,使用人等,使用人簽名后由保養人驗收簽字。每將近更換新冊時,應將舊冊存入技術檔案。
4.建立相應的儀器設備使用管理的制度的規定:
(1)計劃編審與審批制度;
(2)采購驗收及倉庫管理制度;
(3)設備技術檔案制度;
(4)儀器性能精確度鑒定制度;
(5)儀器使用操作規程;
(6)設備作用、維修、保養制度;
(7)設備使用人員考核制度;
(8)設備的領發、破損、報廢、賠償制度;
(9)儀器設備使用安全制度。
如果這些制度訂的嚴密合理,崗位責任制明確,并嚴格執行,儀器設備管理工作流程必然處于一個良好的狀態。在儀器設備使用率方面,應克服盲目引進和本位主義,提倡儀器齊備專管共用,協作共用或多機聯用,以提高儀器設備的利用率。采用多種形式培訓設備管理人中和使用人員。以提高儀器設備使用管理的水平。藥學儀器設備規范化使用,要求使用人工員具有一定的學識水平,經過專門訓練,熟悉儀器設備的性能,并嚴格按操作規程使用。下面對醫院藥學常用儀器設備的使用方法作簡單介紹,有引起儀器設備需按說明書操作。
(一)粉碎機械的使用
1.各種粉碎機械的性能與特點各不相同,應依其性能結合被粉碎藥物的物質及要求的粉碎度合理選用。
2.高速運轉的粉碎機開動后,待其轉速穩定量再加藥,否則因藥物先進入粉碎室,機器難以啟動,引起發熱,甚至會燒壞電動機。
3.藥物中不應夾雜硬物,以免卡塞,引起機發 熱或燒壞。如鐵釘等進入粉碎室,長時間磨擦可引起燃燒,在加料總動員人壁附上電磁鐵裝置可以克服之。
4.各種傳動機構如軸承、傘形齒輪等,必須保持良好的潤滑性,以保證機件正常運轉。
5.電動機及傳動構應用防護罩罩好,以保證安全,同時應注意防塵、干燥與清潔。
6.使用時不能超過電動機負荷,以免啟動困難,停車或燒毀。
7.電源必須符合電動機的要求,使用前應注意檢查,一切電氣設備都應裝接地線,確保安全。
8.各種粉碎機在使用后均應檢查機件,清潔內外各部,添加潤滑油后罩好,必要時予以檢修。
(二)過篩器械的使用
1.根據對粉末細度的要求,選用適宜號數的藥篩。
2.篩內藥粉不宜過多,一般為藥篩容積的1/4為宜。
3.較大粉粒有能通過篩孔時,應取出重新粉碎,不可用于擠壓,以防不適宜的大顆粒通過,或因壓力過大而損壞篩網。
4.藥粉中含水分較高時,應充分干燥后再過篩;易吸溫性藥粉,應在干燥條件下過篩,含油脂多的藥粉,易粘團成塊,可于脫脂后過篩。
5.操作時,應注意防塵,毒劇藥及刺激性較強藥物過篩時,應在密閉裝置中進行,并慶做好完全防護。
6.藥篩用完后,應用軟乞求刷刷凈,必要時用水沖洗,但應及時晾干。
(三)減壓蒸餾裝置的使用
1.減壓蒸餾應選用壁厚耐壓的圓底或梨形儀器,禁用平底儀器,以防在受壓力不均而引起爆炸,連接處亦需利用耐壓像皮管。
2.儀器安裝好后,需檢查嚴密情況和所有達到的嚴密情況。為此,關閉安全瓶活塞,開動減壓泵。若壓力降不下,則應檢查儀器各處連接是否嚴密,必要時適當調整。從壓力計上觀察儀器所能達到的減壓程度。
3.檢查完畢,慢慢打開安全瓶活塞,使與大氣相通,然后關閉減壓泵,停止抽氣。
4.將欲蒸餾的液化倒入蒸餾瓶中,液體量約為其容積的1/2,不可過多。關閉活塞,開動減壓泵。
5.達到所需真空度后,將蒸餾瓶浸入熱浴,加熱蒸餾瓶的球形部分占其體積的2/3,不要觸及熱浴底。逐漸升溫,熱浴溫度要比蒸餾液的溫度出20℃左右。調節進入毛細管的空氣量,使液體保持平衡沸騰。
6.在蒸餾過程中要注意觀察,記錄時間、壓力、沸點、熱浴溫度及鎦出液體的速度等。
7.蒸餾完畢,按下列步驟結束操作:先停止加熱,移去熱源,讓蒸餾瓶自然降溫一段時間,再慢慢打開螺旋夾及安全瓶活塞,放入空氣。當系統內外壓力平衡后,關閉減壓泵,停止抽氣。拆除儀器時先取下接受器,再取蒸餾瓶。
(四)塔式蒸餾水使用
使用時應按要求操作,調節好蒸汽與冷卻水的質量和數量。蒸餾水器要定時拆洗,將內壁附著的鍋垢除去,注意不能擦破表面鍍層。蒸餾水器使用完畢,應趁熱將鍋內余水放盡,下次使用前再放入蒸餾水,以免鹽類及垢物沉積而不宜清洗。
(五)電熱恒濕干燥箱的使用
1.使用前應檢查溫度調節器的性能是否良好,然后根據干燥物質及干燥目的調整至所需溫度。
2.干燥時,應打開排氣孔,以便箱內水分逸出。有鼓風裝置的箱,在加熱和發行量溫過程中必須開啟鼓風機,否則會影響箱內溫度的均勻性和損壞的物品。
3.箱內干燥物不可過多過擠,散熱板上不應放物品,以免影響熱氣流的上升。
4.凡能產生腐蝕性及其它有害氣體的藥材忌用干燥干燥。干燥物含揮發性物質時,應物在空氣中揮發后再放入箱內干燥。
5.干燥玻璃皿時,應待其溫度降至接近溫時再取出,以防止炸破。
6.干燥溫度切忌超過被干燥物的熔點。
7.需要觀察箱內的物品時,可開啟外道箱門,透過玻璃門觀察。但以盡量少開為宜,以免影響恒溫。特別是箱內溫度在200℃以上時,玻璃門因溫度驟降而易破裂。
8.用畢,有關開關和旋鈕應置于零點或關閉,并切斷電源。
(六)電冰箱的使用
1.電冰箱應放在通風干燥處,不得靠近發熱體如暖氣、烘箱等,并避免陽光直射。
2.冰箱底部應墊10cm高的木架,箱后高墻應在15cm以上,以利空氣對流和散熱。開門的時間要短,次數要少,以保持箱內溫度穩定,延長使用壽命。
3.保持箱內清潔,不得貯放有腐蝕性、易燃性和易爆性物品(如強酸、強堿、乙醚、丙酮等),以防其蒸汽腐蝕或發生為災。存放熱物品時,應待物品冷至室溫后再放入。
4.當蒸發器上結冰太厚(5-10mm ),應融化冰層并清洗冰箱內壁,以免影響機器效能,融冰時,可將溫度控制器械上調節鈕擰到“融冰”外,或將帶有半自動化霜裝置的溫度控制器“化霜”撳扭按一下,使機械停下,蒸發器上的結冰即會自然融化。待冰霜融化,再調節旋鈕至原位,使之重新工作。融冰時,禁用硬物敲擊冰層,或用銳器鏟除冰霜,以免損壞蒸發器。
5.電源電壓不能低于額定電壓15%或高于5%,否則機械不能正常運轉或造成電機燒壞接電源時,要接在主電路上,箱殼要接地線,以防電路漏電,造成觸電事故。
6.根據箱外氣溫和貯存量的變化,注意調節溫度控制旋鈕,使箱內溫度恒定在4-6℃。
7.當冰箱發生特異響聲時,應及時檢查一維修。
(七)分析天平的使用
1.使用前檢查天平各零部件是否完好無損,刀墊是否在支架的正確位置,并用軟毛刷拭天平盤。
2.檢查天平是否放在水平位置,如不符合,可以調整墊腳使其保持水平位置核查供電電源與儀器所標注的電壓相符合所接通電源。
3.輕輕開戾升降鈕,使天平梁落下,觀察指針或光幕上“0”刻度線是否指在零點附近,若偏離零點太遠可用調節天平臂上的零點螺絲進行調節;若偏離較小可用底座下面光幕調節桿(鈕)調節。
4.使用天平時,最好將稱物在普通天平上稱得近似重量后,再用帶橡皮套的鑷子將被稱物體置一器皿或襯一隔膜放天平承物盤內,進行精密稱定。
6.觀察天平平衡點時,應在天平門完全關閉后讀取,并連續讀取2-23次。
7.天平不得超負荷使用。
8.稱重時砝運到應順序取用,最重的砝碼應放在天平盤中心。
9.加砝碼試重時,應由大至小依次增減砝碼,輕慢地旋轉升降旋鈕,發現指針偏斜很快時,應立即關閉升降旋鈕,再酌量加減砝碼。
10.揮發性的吸濕性物質應置密閉容器內稱重,酸、堿等腐蝕性物質應絕對避免附著天平盤上。
11.加熱物質稱重時,應放冷至室溫再進行稱量。
12.分析同一檢品,若需數次稱量,則應使用同一架天平和同一組砝碼,以減少誤差。
13.稱量完畢立即將重量記下,應先查砝碼盒內空位,記下重量,然后以先大后小次序取下砝碼放入砝碼盒中,并作一次核對,稱完后,應將被稱物立即取出 。
14.稱量過程中如發現稱量可疑,或連續稱量次數較多,應隨時檢查平衡點有無變動。
15.稱量完畢,必須檢查升降旋鈕是否關閉,被稱物體和砝碼是否取下,自動加砝碼的天平要檢查刻度盤是否指在零上,然后關閉天平門,切斷電源,罩好天平套。
(八)WXG自動指示旋光計的作用
1.按儀器標注的電壓接通電源開關,經5-10分鐘鈉光燈發光穩定后開始測定。
2.將濾色鏡片置于樣品室左端槽里,將裝有蒸餾水的測定管放入樣品室,蓋上箱蓋。
(1)測定管中若有氣泡,應先使氣泡浮在凸頸處。
(2)測定管兩端擴片的霧狀物及水滴,應用軟布擦干。
(3)測定管兩端螺絲帽不宜旋得過緊,以免產生應力,影響讀數。
(4)測定管安裝時應注意位置和方向,以保證每次測定的一致性和準確性。
3.打開示數開關,調節零位手輪,使旋光示值為零。
4.關閉示數開關,取出測定管,棄蒸餾水,用待測溶液蕩洗3次,將待測溶液裝入測定管中,按相同的位置和方法放入樣品室內,蓋好箱蓋。
5.打開示數開關,示數盤即能自動給出該樣品的旋光度。示數盤上紅色示值為左旋,用(-)表示;黑色示值為右旋,用(+)表示。目前較先進型號的旋光度由電子管或液晶顯示,或打印記錄但操作方法基本一致。
6.逐漸按下復測旋鈕,重復3次讀數,取平均值為測定值。
7.使用完畢后,關閉電鈕,斷絕電源,并將測定管立即用水洗凈,晾干。
(九)雷磁25型酸度計的使用
1.裝置電極 儀器配用221型玻璃電極和22型甘汞電極,玻璃電極的塑料帽夾在小夾子上,玻璃電極導線的插頭全部手插在插孔內,甘示電極的金屬帽夾在電極夾大夾子上,電極的高度可以利用電極夾上的支頭螺絲任意調節。
2.校正
(1)置pH-MV于“pH”位置。
(2)將適量緩沖溶液注入試杯,將電極放入溶液中,使玻璃電極之玻璃球及參比電極之毛細管全部浸入溶液,輕輕搖動試杯,使之均勻。
(3)將濃度補償器尖頭旋鈕指于溶液相同之溫度。
(4)根據緩沖溶液的pH值,置量程選擇開關于pH范圍“0-7”或“7-14”。
(5)調節零點調節器使指針指于pH7。
(6)按下讀數開關,使電極接入儀器,如要撳住讀數開關,按下后向右旋動少許即可,然后調節定位調節器,使指針指示標準溶液的pH值。
(7)放開讀數開關,指針應在pH7外,如有變動,應調節零點調節器,并重復6、7之操作。
(8)校正至此結束,以蒸餾水沖洗電極與試杯,校正后勿再旋動“定位調節器”,否則必須重新校正。
3.測量
(1)用濾紙輕輕地將附在電極上的剩余溶液嘛干,或用被測溶液洗滌電極,然后將電極浸入被測溶液中輕輕搖動杯使溶液均勻。
(2)被測溶液之溫度需與標準緩沖液相同,否則需調節“溫度補償器”至被測液之溫度。
(3)指針在放開撳開關后必須指于“pH7”處,否則應調節零點調節器至“pH7”處。
(4)按下讀數開關,指針所指之值即為該溶液的pH值。
(5)若指針讀數超出刻度范圍“0-7”標度尺之左端,可將量程選擇開關置于“7-14”的位置,然后重復(3)與(4)的操作。
(6)測量完畢,放開讀數開關,沖洗電極。
4.電動勢的測定 將pH-MV開關置于所需+MV或-MV處,溫度補償器和定位器不起作用,調零時指針應調至0MV處,其它操作同上,即可進行電位測定和電位滴定。
(十)折光計的使用
1.將折光計安置于充分光線的平臺上(但不可受日光直射),并裝上溫度計,必要時可連接恒溫器,以保持一定溫度。
2.使棱鏡透光后朝光源,將鏡筒拉向觀察者,使成一適當傾斜度。
3.對疹反光鏡,使視野內光線最明亮。若在傍晚或光線不足室內,或測定色澤深的檢品,可將棱鏡上的圓窗打開,以增加光線強度。
4.將下棱鏡拉開,用玻璃或吸管取檢品少許(1-2滴)滴在鏡面上,然后將上下兩塊材鏡合攏、扣緊。
5.旋轉刻度尺旋鈕,使讀數在檢品折光率附近,然后放置補償器旋鈕使視野內明暗分界恰位于十字交叉點,如此反復操作三次,取三次讀數的平均值。
6.打開讀數筒小反光鏡,適當采光,記下刻度尺的讀數及溫度,即為該溫度時檢品的折光率,左則系含蔗糖百分率讀數,右則為折光率讀數。
7.測定完畢,如檢品為水溶液,應隨即用脫脂棉吸去檢液滴蒸餾水干標棱鏡上,再用脫脂棉吸干,反復洗滌3次,最扣用拭鏡紙或脫脂棉輕輕揩拭干凈。如檢品為油類物質,應隨即用蘸有二甲苯或乙醚的脫脂棉將棱鏡按上法揩拭干凈。
(十一)72型光電分光光度計的使用
1.檢查供電電源與儀器所標注的電壓的否符合,插上電源。
2.把單位光器的光路閘門板到黑點位置,將微電計電源開關旋到“開”處,此時指方向調節光點即出現在標尺上。用零點調節器將指示光點調于透光率標尺“0”位上。
3.啟開穩壓器的電源開關和單色光器的光源開關,把光路閘門扳到經點,再按順時針方向調節光量調節器至光門適當開啟,使微電計的指示光點達到標尺的上限附近,隔10分鐘,待硒光電池趨向后,再開始使用儀器。
4.將單色光器上的光路閘門重新扳到“黑”點處,再一次校正微電計指示光點于“0”位,開啟光路閘門。
5.打開吸收池暗箱蓋,取出吸收池架,將一只吸收池內裝入空白溶液或蒸餾水,其余3只裝入待測溶液。把已放有吸收池的吸收池架重新置于暗箱內定位裝置上,蓋好暗箱蓋。裝空白溶液的吸收池應放在吸收池架的第一個格。以便操作。
6.用波長調節器把所需的波長調節至對準紅線(此時盛空白液的吸收池正在光路上),按順時針方向輕輕旋動光量調節器,把指示光點調于透光率100的讀數上。
7.將吸收池定位背裝置拉桿拉出第一格,使第一個未知濃度的溶液進入光路,此時微電計標尺上所指的讀數即為該溶液的吸收度及透光率。再依次將第二及第三個未知濃度的溶液推入光路內。讀取其吸收率和透光率。
8.在未各有濃度溶液測定前,應先配一系列濃度的標準溶液,測其吸收度,坐標紙上以濃度作橫坐標,吸收度作縱坐標,繪出溶液的標準曲線。
9.使待測定溶液處在光路中,來回轉動波長調節器,與透光率最低值相對應的波長(即吸收度最大的波長),即為所選擇的波長。
(十二)751型分光光度計的使用
1.按儀器標注的電壓接通電源,將放大器開關及鎢燈(或氫弧燈)開關撥至“開”處,預熱20分鐘,將暗電流閘門撥至“關”的位置,選擇開關扳至“校正”,波長刻度旋鈕至所需要的波長上。
2.選擇適當波長的光電管,手柄拉桿推入為藍敏江電管(200-625nm),拉出即為紅敏光電管(625-1000nm)。按相應的波長選擇光源燈(鎢燈適用于波長在320-1000nm范圍內,氫弧燈適用于320dnm以下),將主機后面的反射鏡手柄轉向所用光源燈。根據需要還可在光路中插入一濾光片,以減少雜散光(一般情況不必要)。
3.選擇適當的呼吸池,350nm以上波長可用玻璃吸收池,350nm以下的波長一定要選用石英吸收池。將待測溶液與空白溶液分別注入適當的吸收池中,放入吸收池托架內,蓋好板蓋。
5.向右放置靈敏度旋鈕,在正常情況下,從左邊停止的位置向右轉3-5圈。
6.移動樣品槽手柄,使標準液移至光路中,應注意使滑動板處于定位槽中。
7.將透光率旋鈕旋至透光率100%。
8.將選擇開關扳到“X1”上。
9.拉開暗電流閘門,使單色光進入光電管。
10.調節狹縫旋鈕,使電表指針大致指在零上,然后用靈敏度旋鈕細微調節,使電表指針正確指在零位。
11.拉動試樣槽手柄,將樣品溶液置于光路中,此時電表所指偏離零位。
12.旋轉透光率旋鈕,使電表指針重新移至零位。
13.待平衡后,將暗電流閘門上,以保護光電管。
14.讀取透光率或相應的吸收值。當選擇開關放在“X10”時,透光率范圍為0-100%,相應的吸收率為∞0;當透光率小于10%時,可把選擇開關放在“X0.1”的位置,此時讀出的透光率數值應以10除之,或將讀出的吸收度值加上1。
15.用同一空白溶液測試幾個樣品溶液時,只需重復(11)-(14)項操作即可。
16.儀器用畢,應依次關閉放大器械、鎢燈(或氫弧燈)電源,將選擇開關扳至“關”處,狹縫旋鈕旋至 0。01,波長旋鈕至625nm處,透光率旋鈕至100%。暗電流旋鈕及靈敏度旋鈕賂左旋到底,取出盛溶液的吸收池,用水沖洗干凈,晾干備用。
(十三)紅外分光光度計的使用固體樣品采用壓片法或糊劑法處理,液體樣品直接取一小滴,夾到樣品池的兩窗片之間,控制一定的厚度(一般為0.01-0.1mm)即可。
1.檢查供電電源與儀器標注的電壓是否相符,不符應調壓,儀器中的三芯電源線必須同時使用,不可將線接錯。
2.打開電源開關,預熱10-15分鐘。
3.裝上圖紙和需要的記錄筆,使記錄筆恰落在圖線的4000cm-1線上。
4.調節時間常數開關、掃描方式開關、狹縫旋鈕、100%調節旋鈕及增益開關到需要的位置。
5.將標準樣品聚苯乙烯蒲膜(厚度為0.05mm)置于樣品架上照射,將掃描結果與標準圖譜核對,用2851cm-1、1601 cm-1、1028 cm-1、907 cm-1的吸收峰對儀器的讀數進行樣正,在200~400 cm-1區間允許相差±4 cm-1,在4000~2000 cm-1區間允許相差±8 cm-1。上述光譜中,儀器要求在3110~2850 cm-1范圍內能清晰分辨出7個峰,從1583 cm-1最高點至1590 cm-1最低點的波谷濃度不小于12%T,從2851 cm-1最高點至2870 cm-1最低的波谷嘗試不小于18%T。
6.把準備好的樣品置于樣品池中,再放于儀器的樣品架上。
7.按下儀器的啟動開關,儀器即自動從4000 cm-1進行掃描,直到200 cm-1自動停止。
8.撕下圖紙,取出樣品,關閉儀器電源及總電源開關。
9.取下記錄筆,放于筆架上,用硬紙板將紅外線入口關好。
10.用細綢布將儀器擦拭干凈,放置于燥硅膠,蓋好防塵罩。
(十四)熒光分光光度計的使用對儀器進行靈敏校正、波長校正、激發光譜和熒光光譜校正后,按各藥品項下規定,配制對照和供試品溶液。道德按儀器說明書要求的方式,選定激發光波長和發身光波長,并在測定前,用一定濃度的對照液校正儀器的靈敏度,然后在相同條件下,讀取對照溶液及其試劑空白與被試品及其試劑空白的讀數即得所測值。
(十五)PC-3B型藥物溶出度儀的使用
1.水箱補水 水達到水平線即可。接通電源,預置溫度鍵,按下轉軸電機開關。
2.轉籃法 除另有規定外,量取經脫氣處理的溶劑900ml,注入每個操作容器內,加熱使溶劑溫度保持在37±0.5℃,調整轉速使其穩定。取供試品6片(個)分別投入6個轉籃內,將轉籃降入容器中,立即開始記時。除另有規定外,至45分鐘時,在轉籃上端液面中間離燒杯壁10mm的取樣點吸取溶液適量,立即經0.8μm濾膜濾過,自取樣至濾過應在30秒中內完成。取濾液,照該藥品項下測定,算出每片(個)試品的溶出量。
3.漿法 除另有規定外,量取經脫氣處理的900ml,注入每個操作器內,加溫使保持在37±0.5℃,調整轉速使其穩定。取供試品6片(個),分別投入6個操作容器內,立即開始計時。除另有規定外,至45分鐘時,在漿液上端液面中間離杯壁10mm的取樣點收取適量溶液立即經0.8μm濾膜濾過,自取樣至濾過應在30秒內完成,取濾液該藥品項下規定的方法測定算出每片(個)試品的溶出量。
4.結果判斷轉籃法和漿法結果判斷原則相同。6片(個)中每片(個)的溶出量,按標本含量計算,均應不低于規定限度(Q)。1~2片(個)低于規定限度,但不低于為標示含量70%。如6片(個)中僅有1~2片(個)低于規定限度,但不低于Q~10%,且其平均溶出量不低于規定限度,仍可判斷為符合規定。若6片(個)低于Q~10%,應另取6片(個)復試。初、復試的12片(個)中僅有1~2片(個)低于Q~16%,且平均溶出量不低于規定限度,亦可羊為符合規定。每個轉籃中供試品的取用量如為2片(個)以上,算出每片(個)的溶出量,均不低于規定限度(Q),則不再復試。
5.累積溶出量的測定 除另有規定外,量取經脫氣處理的溶劑900ml,注入每個溶出杯,加溫溶劑使保持在37±0.5℃,調整所需轉速,使其穩定。精密稱量的供試品6片立即計時,按預先設計的時間間隔準確取樣,操作同轉籃法。每取一次樣品液后立即沿杯壁加入相同體積并經預熱到37℃的溶劑。取出的樣品液按法測定濃度,計算溶出量和進行數據處理。
6.其他 每次測定開始,均應蓋上溶出杯蓋。測定結束依次關掉轉軸電機、控溫鍵、電源開關,去掉溶出杯蓋,把轉軸提升至最高位置,翻起機關箱。清洗溶出杯。結果較長時間不用,應將轉軸取下,擦干后放務件箱內,并放掉水浴箱中的水。
(十六)TDx快速血藥濃度檢測儀應用
1.開機程序
(1)開機前,打開左側蓋,接緩沖液管,同時檢查緩沖液量是否充足。注意注射器內不可有氣泡,用蒸餾水清洗探頭后,用吸水紙輕輕將其粘干。
(2)啟動開關ON(在TDx機左后位置),開機。
(3)電腦操作視屏顯示DATE,按月、日、年順序輸入時間,如時間序數為個位數,則在其前面加“0”。按下“STORE”鍵,視屏顯示“TIME”鍵。
(4)TDx機預熱5分鐘(倒數計),注意顯示屏出現“REAKY”。
2.藥物濃度檢測操作程序
(1)樣品準備:抽取病人血液1~2ml,靜置使其自然沉淀,用吸管吸取50l的血清加入樣品杯,注意檢查血樣品有無氣泡。
(2)準備藥盒:由冰箱(2~8℃)內取出檢測的藥品試劑盒(注意核對),水平輕輕來回搖動試劑盒,以避免藥物沉淀致吸取藥物濃度不均。打開3個瓶蓋與藥品一致不可亂蓋,然后將試劑盒放入TDx機試劑盒槽內。
(3)準備轉盤:用標有數字之樣品轉盤,按檢測樣品數由轉盤1~20順序加入等量的玻璃比色管和塑料樣品杯。加樣操作同樣品準備。然后鎖上轉盤,手持轉盤中央之軸順時針方向轉動,聽到“咯嗒”一聲,將轉盤放入TDx機中。
(4)蓋上機門,視屏顯示“READY”后,方可進行以下操作。
(5)進行檢測,按下“RUN”,之后一切由儀器自動操作。注意此期間內絕不可打開機門,不能按鍵。熒屏顯示“DONE-REMOVERPAK”,取出試劑盒。同時伴有“…”聲,即檢測全部完成。打開機蓋,取出試劑盒,蓋好蓋,位置不能弄錯,然后蓋上機蓋,將試劑蓋放入冰箱(2~8℃)保存,以備后用。
(6)分析結果,清洗探頭。
(7)寫出報告 在操作過程中聽到“…”聲響時,應立即查看熒光屏上指令,及時發現問題并予處理。若無問題則是全部檢測結束,應取走藥盒,撕下打印報告。
(8)重讀資料按“SYSTEM4.IRUN”,把結果打一遍,按“SYSTEM4.2RUN“把結果顯示一遍。
(9)標準曲線、質控及光路檢測、溫度檢測、吸量檢測等均按有關程序操作。
3.關機操作程序
(1)按“PRIME”鍵多次。
(2)將探針拉到中間位,用蒸餾水洗探針頭,然后用清潔軟紙吸干凈。
(3)若停機數天后才啟動TDx機,需要打開TDx機左側機蓋,取出連接緩沖瓶的塑料管,然后接蒸餾水瓶。再按“PRIME”多次,清洗注射器。
(4)將TDx開關按到“OFF”,開啟機門,查看TDx機內有無試劑污染,若有可用清水棉球擦之。
(十七)氣相色譜儀使用
1.固定相 氣液氣譜法的固定相就是已涂漬固體液的擔體。常用于血藥濃度測定的固定液有SE-30、OV-1、OV-17及PEG-20M以上,適用于分離甾體、生物堿及絕大多數藥物。OV-17等為中等極性物,最高使用溫度為350℃,對有極性官能團的藥物有較大的選擇性,PEG-20M是分子量為2萬的醇類固定液,極性較強,最高使用溫度在250?/FONT>C以下,適于極性較小藥物的分離。
用于涂漬因定液的擔體是無機硅藻土類擔體,有酸洗和堿洗耳恭聽兩種,其表面已純化,適用于氣液色譜法。
固定液的涂漬方法,以使用OV-17為例說明,稱取占擔體為3%的OV-17,溶于乙醚或氯仿中。將稱好的擔體一次加入,迅速攪勻,并不時攪拌,放于通風處,待溶劑完全揮發后放在烘箱中加熱老化以物底除去殘余液體及揮發性雜質,并促使固定液牢固均勻地分布在擔體表面及毛細孔洞中。
層析柱在填裝前,先將不銹鋼用5%NaOH、水、乙醇、乙醚依次洗滌,最后用水沖洗至中性,烘干。如選用的是螺旋形柱,則用抽氣法將涂好的擔體裝入。如先用U形柱,則邊裝邊敲擊,將裝好的柱聯入儀器中,用較低的載氣流速,在略高于實驗使用溫度但低于固定液的最高使用溫度條件下,處理幾小時至十幾小時直至基線走直為止。
2.流動相 流動相(常稱載氣),有氮、氫、氦、氬等氣體,由高壓瓶供氣。載氣中的氧、烴類及水分等雜質必須除盡或只允許一定的限量。載氣流量變化應小于1%。
3.進樣與檢測 經過前處理的試樣,取1~10μl注入儀器的進樣品,速度要快,否則影響柱效;每次注樣必須準確一致,保證出峰的重現性。之后,由載氣將組分帶到檢測器。檢測器能將組分的濃度或質量轉變為容量測量的電信號,以峰的形式記錄或顯示。氣相色譜法的靈敏與否,關鍵在于檢測器。適用于血藥濃度測定的檢測器有以下幾種:①氫火焰發離子化檢測器(FID),對有機物質的檢測限為50mg。②電子捕獲檢測器(ECD),對負電性有機物的檢測限pg級。③氮檢測器(N-FID),對含氮有機物的檢測限為ng級。④質譜檢測器(NSD)常和氣相色譜儀聯用。若將特征碎片重復掃描幾百次,獲得由強度及掃描時間組成的色譜質譜峰,檢測限在ng-pg級。
(十八)高效液相色譜儀的使用
1.色譜柱 它包括空柱和填料??罩莾缺趻伖獾牟讳P鋼管,內徑為4~5mm,長100~250mm。按氣相色譜法中洗滌空柱的方法洗凈,用勻漿法填充固定相。將此柱裝入儀器的管路中,用柱式機械往復泵輸入新鮮脫氣的流動相。等基線平直后可用苯、萘、菲的混合試液,用正己烷(含0.05%甲醇)或甲醇:水(83:17)為流動相測定柱效及分離度塔板數在2~3萬/ml以上及分離度在1.5以上者,柱效好。為防止柱污染,常用1個mm長,4~5mm內徑,裝有硅膠(40-50mm)或立柱相同填料的保護柱(預柱)接在主柱之前,以延長色譜柱的壽命。反相鍵合相柱用畢。必須用水充分流經,以洗去鹽類、酸堿等雜質防止柱生銹及填料中雜質的積聚,再用甲醇流經洗滌使色譜柱獲得再生。
2.流動相的洗脫方式 配好經脫氣的流動相放于貯液瓶中,經過有濾過頭、內徑2mm的聚四氟乙烯管流入高壓泵進入色譜柱,最后自檢測器流出或收集或作廢液回收。用流動相洗脫的方式有恒溶劑脫洗法(isocratic dlution),即自洗脫開始到結束,溶劑的配比恒定。另一類為梯度洗脫法(gradicnt clution),即使溶劑的極性強度在色譜過程中逐漸增加。須按一定程序不斷改變流動相的濃度配比,從而使同一個試樣中組分性質相差較小的及較大的都能在一次色譜過程中很好分離,而整個色譜過程縮短。必須注意,梯度洗脫法不能用于分子排阻色譜及用電化學檢測的反相高效液相色譜法中。
3.檢測器 適用于血藥濃度的檢測器有紫外線吸收,熒光發射和電化學三種。紫外檢測器應用于對紫外光有吸收的藥物,大多數藥物分子對紫外光有吸收,故能較普遍采用,檢測限有0.1μg左右。紫外檢測器有固定波長型、可變波長型及掃描器,既能使流動相停流作組分的定性定量檢測,又能提高測定靈敏度,重現性較好。熒光發射檢測器對能產生熒光的藥物才能使用。80年代應用激光替代氙燈光源,光強度增加了3~4倍,對某些藥物的檢測限可達pg級。電化學檢測器是由一個碳糊或破碳做成的蒲層電解池。常用于檢測兒茶酚胺類及有酚類基團的各種藥物和代謝物。流出組分進入2μl的薄層電解池,在一暄電壓下電解產生電流,放大后檢測,檢測限pg級。
4.數據處理 現代高效液相色譜儀帶有數據處理系統,除記錄譜外,還能自動記錄峰的保留時間,能自動積分求算峰面積,并能按照預定的程序作有關計算,報告分析結果。
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